2 X Fast Pfus PCR 마스터 믹스

2 X Fast Pfus PCR 마스터 믹스
제품 소개:
충실도가 높은 제품은 평면 터미널입니다.
카탈로그 번호:G3305-05
브랜드:서비스바이오
사양:1mL
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설명
기술적인 매개 변수

제품소개

 

제품명

고양이. 아니요.

투기.

2 x Fast Pfus PCR 마스터 믹스

G3305-01

1mL

G3305-05

5×1mL

 

제품 설명/소개

 

이 Fast Pfus PCR 마스터 믹스는 변형된 Pfu DNA 중합효소, dNTP 및 루틴 PCR, 콜로니 PCR, 복잡한 템플릿이 있는 PCR 및 높은 GC 템플릿을 위한 2X 농도의 최적화된 PCR 반응 완충액을 포함하는 즉시 사용 가능한 PCR 프리믹스입니다. Mix 용액의 농도가 1X가 되도록 주형, 프라이머, ddH2O만 첨가하면 PCR 증폭이 가능합니다. 강력한 증폭 능력, 빠른 증폭 속도, 최대 5-15 s/kb의 확장 속도, 높은 충실도, 높은 특이성, 증폭 제품은 플랫 엔드입니다. Loading Dye가 제품에 첨가되었으며, 증폭된 산물은 바로 아가로스겔 전기영동 검출에 사용될 수 있습니다.

 

보관 및 배송 조건

 

젖은 얼음으로 배송하십시오. -20도에서 보관하세요. 12개월 동안 유효합니다. 반복적인 동결-해동을 피하십시오.

 

제품 내용

 

요소

G3305-01

G3305-05

2 x Fast Pfus PCR 마스터 믹스

1mL

5×1mL

수동

1부

 

분석 프로토콜/절차

 

1. 권장 PCR 반응 시스템

요소

20μL RXN

50μL RXN

최종 농도

템플릿a

변하기 쉬운

변하기 쉬운

필요에 따라

정방향 프라이머(10μM)b

0.8 μL

2 μL

0.4 μM

역방향 프라이머(10μM)b

0.8 μL

2 μL

0.4 μM

2×Fast Pfus PCR 마스터 믹스

10 μL

25 μL

(DMSO,선택 사항)c

(0.6 μL)

(1.5 μL)

(3%)

ddH2O

20μL에 추가

50μL에 추가

 

 

a: 템플릿의 양이 많을수록 비특이적 PCR 산물이 생성될 위험이 높아집니다. 템플릿의 양이 적으면 증폭의 정확도가 떨어집니다. 템플릿이 플라스미드이거나 박테리오파지인 경우 50μL rnx에 50ng{2}}pg를 추가하는 것이 좋습니다. tempalted가 게놈 DNA인 경우 50μL rnx에 250ng{5}}ng를 추가하는 것이 좋습니다. 템플릿이 cDNA인 경우 원본 cDNA를 2-100배로 희석하고, 반응에 추가되는 희석된 cDNA의 양은 전체 반응 양의 10%를 넘지 않습니다. 템플릿이 세균액 또는 조추출물 샘플인 경우, 반응에 추가되는 부피는 전체 반응 부피의 10%를 넘지 않습니다. 템플릿의 양이 많을수록 비특이적 증폭이 발생하는 경향이 있습니다. 템플릿의 양이 적으면 PCR 증폭 효율이 낮아지는 경향이 있습니다.

b: 사용된 최종 프라이머 농도 범위는 {{0}}.2-1.0 μM이며, 0.4 μM을 권장합니다. 프라이머가 너무 적으면 증폭 수율이 낮거나 전혀 없을 수 있으며, 프라이머가 너무 많으면 비특이적 증폭이 발생할 수 있습니다.

c: 높은 GC 함량 템플릿의 경우 총 부피가 10% 이하인 DMSO입니다.

2. 권장 PCR 증폭 조건

단계

온도

시간

사이클 수

초기 변성a

98도

30 s-120 s

1

변성

98도

5-10 s

25-35

어닐링b

50-72도

10-30 s

확장

72도

5-15초/kb

최종 연장

72도

5-10분

1

잡고 있다

4-16도

영원히

 

a: 30초의 사전 변성 시간은 대부분의 기존 템플릿에 적합합니다. 복잡한 템플릿은 최대 2분 동안 변성될 수 있습니다.

b: 연결된 프라이머를 포함하는 복잡한 템플릿을 증폭하는 경우 어닐링 시간을 최대 30초까지 연장할 수 있습니다.

c: 권장 확장 단계는 플라스미드와 같은 간단한 템플릿의 경우 72도에서 5-10 s/kb, 루틴 게놈 DNA 템플릿의 경우 10-15 s/kb, 복잡한 템플릿의 경우 15-30 s/kb입니다. .

 

메모

 

1. 사용시 완전히 해동하고 혼합하십시오. 완전히 해동 한 후 최소 2 주간 4도 안정 보관소에 보관할 수 있으며 반복 냉동 및 해동을 피하십시오.

2. 고객님의 안전과 건강을 위해 보안경, 장갑, 보호복 등을 착용하시기 바랍니다.

 

 

연구용으로만 사용하세요!

 

 

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