엑소좀 분리용 크로마토그래피 컬럼(세포 상청액)

 

제품명	고양이. 아니요.	투기.
엑소좀(혈청/혈장) 분리를 위한 크로마토그래피 컬럼	G4112-5	5

 

 

엑소좀은 혈액, 타액, 소변, 모유 등 체액에 자연적으로 존재합니다. 이는 세포에 의해 세포외 공간으로 활발하게 분비되는 균일한 크기와 30~150 nm의 입자 크기를 갖는 나노 규모의 막성 소포입니다. 이 소포에는 고유의 특정 마커가 있으며 단백질, mRNA, miRNA, 지질 및 기타 물질로 코팅되어 있어 세포 간 물질 및 신호 전달의 통로로 사용될 수 있으며 세포 성장, 세포 증식, 세포 과정에 참여합니다. 분화, 세포 이동, 혈관 신생 및 종양 성장.

본 제품은 혈청/혈장 엑소좀의 신속한 분리 및 정제에 적합한 크기 배제 크로마토그래피 컬럼(SEC)입니다. 단백질을 효율적으로 제거하는 동시에 고순도 및 자연 활성도가 높은 엑소좀을 유지할 수 있습니다. 전통적인 초원심분리 방법에서 초고속 원심력으로 인한 세포외막 구조의 손상을 효과적으로 방지하는 동시에, 전통적인 침전 방법에서 고농도 단백질 및 기타 물질이 엑소좀의 순도에 미치는 영향을 줄입니다.

 

 

실온에서 운송; 유효기간은 12개월로 실온에 보관하세요.

 

 

요소	G4112-5
엑소좀(혈청/혈장) 분리를 위한 크로마토그래피 컬럼	5개
제품 매뉴얼	1개

 

 

1. 준비

a) PBS(G4202 권장)와 같은 실온의 멸균 완충액을 준비합니다.

b) 실온, 멸균 0.1M NaOH 시약 및 20% 에탄올을 준비합니다.

c) 분리 컬럼을 사용하기 전에 분리 컬럼의 빨간색 상부 커버를 제거하고 브라켓(G6063 권장)에 장착하여 사용하십시오.

2. 엑소좀 분리

a) 혈청/혈장 생물학적 샘플 0.22 μm 막 여과, 백업용 예비 정제 사용;

b) 분리 컬럼의 흰색 바닥 덮개를 제거하고 컬럼 내부의 보호액이 유출된 후 완충액 총 30 mL를 일괄 첨가하여 분리 컬럼을 청소합니다.

c) 체판 위의 완충액이 모두 분리 컬럼으로 들어간 후; 2.a 단계의 예비 혈청/혈장 {{0}}.5mL를 취하여 체판 중앙에 첨가합니다(0.5mL 미만인 경우 완충 용액을 첨가합니다). 최대 0.5mL로 구성);

d) 혈청/혈장 모두 체판을 통과하여 분리컬럼으로 들어간 후 완충용액 2.5mL를 첨가한다.

e) 전 단계의 완충용액이 모두 체판을 통과하여 분리컬럼에 들어간 후 완충용액 1 mL를 첨가한다. 동시에, 자연적으로 활성인 엑소좀이 풍부하고 후속 실험에 사용하거나 백업을 위해 -80도에서 냉동할 수 있는 세척 ​​용액 1mL를 수집합니다.

3. 분리 후 처리

a) 엑소좀 분리가 완료된 후, 총 30 mL의 완충용액을 일괄 첨가하여 분리 컬럼을 세척하는 단계;

b) 혈청/혈장 엑소좀을 분리하기 위해 분리 컬럼을 계속 사용해야 하는 경우 2.c)~2.e) 단계를 반복합니다.

c) 혈청/혈장 엑소좀 분리를 위해 분리 컬럼을 계속 사용할 필요가 없는 경우 먼저 0.1M NaOH 5 mL를 첨가하여 분리 컬럼을 세척한 후 총 20 mL의 완충용액을 첨가합니다. 배치를 사용하여 분리 컬럼을 세척하고 균형을 맞춘 다음 20% 에탄올 5mL를 첨가하여 분리 컬럼을 세척합니다. 청소 후 분리 컬럼의 흰색 하단 덮개를 덮으십시오. 마지막으로 20% 에탄올 2mL를 첨가하여 수분을 공급하고 분리컬럼의 빨간색 상단을 덮고 조여 분리컬럼을 상온에서 보관합니다.

 

 

1. 서로 다른 혈청/혈장에서 엑소좀을 분리할 때, 본 제품의 용출곡선 및 순도가 약간 다를 수 있으나 전체적인 경향에는 영향을 미치지 않습니다.

2. 시료의 크기가 크거나 시료 내 엑소좀 함량이 낮은 경우에는 분리 크로마토그래피 컬럼을 이용하여 시료를 먼저 농축한 후 분리할 수 있습니다.

3. 본 제품에서 혈청/혈장 엑소좀을 분리하는 과정에서는 분리 컬럼의 액체 흐름이 장기간 중단되지 않도록 해야 합니다.

4. 본 제품을 사용하는 동안 동일한 컬럼에서 서로 다른 출처의 생체시료를 분리하지 말고, 동일한 컬럼을 5회 이상 재사용하지 마십시오.

5. 본 제품은 상온 보관 및 사용에 적합하며, 저온 사용 및 고온 가열은 피하시기 바랍니다.

6. 실험 중에는 오염 방지와 안전 확보를 위해 실험복과 일회용 장갑을 착용하시기 바랍니다.

 

연구용으로만 사용하세요!